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环境条件对淀粉酶活性的影响

作者:admin 来源:未知 时间:2021-04-17 02:22:47 点击:

[文章前言]:一,目的植物组织中存在淀粉酶(α-和β-),可将储存的淀粉水解为麦芽糖。从而影响种子的发芽或植物的生长。该实验的目的是测量淀粉酶活性,并观察环境条件(例如温度,pH)和某

一,目的

植物组织中存在淀粉酶(α-和β-),可将储存的淀粉水解为麦芽糖。从而影响种子的发芽或植物的生长。该实验的目的是测量淀粉酶活性,并观察环境条件(例如温度,pH)和某些化学物质对淀粉酶活性的影响。

2.原则

淀粉酶的活性与其他酶相同。它受环境条件的影响,尤其对温度和pH的变化敏感,显示出最高温度和最高pH的现象。在最适温度和最适pH的环境下,酶活性最强,酶促反应速度最高。低于或高于最佳温度和pH值,酶活性变弱,酶促反应速度降低。

除了温度和pH值外,某些化学物质还可以抑制或促进酶的活性。能抑制酶活性的化学物质称为酶抑制剂,能促进酶活性的化学物质称为酶活化剂。

受环境条件影响后,可以通过碘测试方法检查淀粉酶活性的强度。

3.材料,设备和试剂

1.材料:小麦种子;水稻种子。

2.设备:恒温水浴;恒温培养箱试管;150ml锥形瓶砂浆;烧杯吸管;塑料滴管试管架;温度计。

3.试剂:柠檬酸磷酸盐缓冲液系列;pH5.0醋酸盐缓冲液(根据附录2制备)。

I-KI溶液:称取2gKI并将其溶解在蒸馏水中,然后添加1gI2,待全部溶解后,用蒸馏水将体积稀释至300ml,并保存在棕色瓶中以备后用。

0.5%淀粉溶液。

1%CuSO4溶液。

1%KI溶液。

0.1%HgCl2溶液。

1%NaCl溶液。

0.1%AgNO3溶液。

四,实验步骤

1.淀粉酶的提取

取20粒发芽的大米或小麦种子(豆芽长3??4cm),用研钵研磨,用100ml水冲洗匀浆几次,在150ml锥形瓶中浓缩,搅拌均匀,静置1小时。过滤到另一个三角烧瓶中。滤液含有淀粉酶。对于短期存储,请添加几滴甲苯作为防腐剂,并将其放入冰箱中。

2.温度对淀粉酶活性的影响

取5个试管,分别标记15、30、45、60、75℃,并标记“酶溶液管”,各加5ml酶提取液。再取5支试管,分别在15、30、45、60、75℃的温度下作标记,并标记“淀粉液管”,分别加入0.5ml淀粉液5ml。然后将每个试管放入相应温度的水浴中,约5分钟后,等待试管内外温度相同,将酶液在相同温度下倒入淀粉液试管中,摇匀并记录时间,取10分钟后取出(不同处理之间的时间应该相同),将其放入冰水中冷却1分钟,向每支试管中加入5滴I-KI溶液,摇匀。观察颜色差异,比较不同温度对淀粉酶活性的影响,并确定最适合酶促作用的温度。

3.pH对淀粉酶活性的影响:

取4个中型试管,加入3ml以下系列的pH柠檬酸磷酸盐缓冲溶液,并标记它们:pH3.6、4.8、6.0、7.2。在每支试管中加入3ml淀粉溶液和2ml淀粉酶提取物,摇匀,记下时间,在大约30℃的温度下将5滴I-KI溶液放入每支试管中20分钟,摇匀,根据颜色产生淀粉酶活性。

4.化学物质对淀粉酶活性的影响

取6个1至6号试管,在每个试管中加入1ml淀粉酶提取物和1mlpH5.0的乙酸盐缓冲液,然后在试管1中添加1ml蒸馏水(对照)。向试管2中加入1%NaCl1ml;向试管3中加入1%碘化钾1ml;将1%CuSO41毫升加入试管4;向管5中加入0.1%AgNO31ml;向试管6中添加0.1%的HgCl2(注意,有毒!),向每支试管中添加2ml的0.5%淀粉溶液,充分摇匀并置于40℃恒温水浴中,并记录开始时间,并保持8-10min,取出试管,冷却后向每支试管中加入5滴I-KI溶液,摇匀,观察每支试管的颜色差异。

5.实验结果记录与分析

1.用文字说明在不同温度,pH和各种????化学物质处理后每个试管的颜色。

2.简要分析环境条件对淀粉酶活性的影响。

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