环境条件对淀粉酶活性的影响

一，目的

植物组织中存在淀粉酶（α-和β-），可将储存的淀粉水解为麦芽糖。从而影响种子的发芽或植物的生长。该实验的目的是测量淀粉酶活性，并观察环境条件（例如温度，pH）和某些化学物质对淀粉酶活性的影响。

2.原则

淀粉酶的活性与其他酶相同。它受环境条件的影响，尤其对温度和pH的变化敏感，显示出最高温度和最高pH的现象。在最适温度和最适pH的环境下，酶活性最强，酶促反应速度最高。低于或高于最佳温度和pH值，酶活性变弱，酶促反应速度降低。

除了温度和pH值外，某些化学物质还可以抑制或促进酶的活性。能抑制酶活性的化学物质称为酶抑制剂，能促进酶活性的化学物质称为酶活化剂。

受环境条件影响后，可以通过碘测试方法检查淀粉酶活性的强度。

3.材料，设备和试剂

1.材料：小麦种子；水稻种子。

2.设备：恒温水浴；恒温培养箱试管;150ml锥形瓶砂浆;烧杯吸管;塑料滴管试管架;温度计。

3.试剂：柠檬酸磷酸盐缓冲液系列；pH5.0醋酸盐缓冲液（根据附录2制备）。

I-KI溶液：称取2gKI并将其溶解在蒸馏水中，然后添加1gI2，待全部溶解后，用蒸馏水将体积稀释至300ml，并保存在棕色瓶中以备后用。

0.5％淀粉溶液。

1％CuSO4溶液。

1％KI溶液。

0.1％HgCl2溶液。

1％NaCl溶液。

0.1％AgNO3溶液。

四，实验步骤

1.淀粉酶的提取

取20粒发芽的大米或小麦种子（豆芽长3??4cm），用研钵研磨，用100ml水冲洗匀浆几次，在150ml锥形瓶中浓缩，搅拌均匀，静置1小时。过滤到另一个三角烧瓶中。滤液含有淀粉酶。对于短期存储，请添加几滴甲苯作为防腐剂，并将其放入冰箱中。

2.温度对淀粉酶活性的影响

取5个试管，分别标记15、30、45、60、75℃，并标记“酶溶液管”，各加5ml酶提取液。再取5支试管，分别在15、30、45、60、75℃的温度下作标记，并标记“淀粉液管”，分别加入0.5ml淀粉液5ml。然后将每个试管放入相应温度的水浴中，约5分钟后，等待试管内外温度相同，将酶液在相同温度下倒入淀粉液试管中，摇匀并记录时间，取10分钟后取出（不同处理之间的时间应该相同），将其放入冰水中冷却1分钟，向每支试管中加入5滴I-KI溶液，摇匀。观察颜色差异，比较不同温度对淀粉酶活性的影响，并确定最适合酶促作用的温度。

3.pH对淀粉酶活性的影响：

取4个中型试管，加入3ml以下系列的pH柠檬酸磷酸盐缓冲溶液，并标记它们：pH3.6、4.8、6.0、7.2。在每支试管中加入3ml淀粉溶液和2ml淀粉酶提取物，摇匀，记下时间，在大约30℃的温度下将5滴I-KI溶液放入每支试管中20分钟，摇匀，根据颜色产生淀粉酶活性。

4.化学物质对淀粉酶活性的影响

取6个1至6号试管，在每个试管中加入1ml淀粉酶提取物和1mlpH5.0的乙酸盐缓冲液，然后在试管1中添加1ml蒸馏水（对照）。向试管2中加入1％NaCl1ml；向试管3中加入1％碘化钾1ml；将1％CuSO41毫升加入试管4;向管5中加入0.1％AgNO31ml;向试管6中添加0.1％的HgCl2（注意，有毒！），向每支试管中添加2ml的0.5％淀粉溶液，充分摇匀并置于40℃恒温水浴中，并记录开始时间，并保持8-10min，取出试管，冷却后向每支试管中加入5滴I-KI溶液，摇匀，观察每支试管的颜色差异。

5.实验结果记录与分析

1.用文字说明在不同温度，pH和各种????化学物质处理后每个试管的颜色。

2.简要分析环境条件对淀粉酶活性的影响。

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